《鐵道游擊隊》描述了在抗日戰爭時期,魯南棗莊礦區有一批煤礦工人和鐵路工人,由于不堪日寇的屠殺和蹂躪,在共產黨的領導下,秘密地組織和武裝成為一支短小精悍的游擊小分隊,以打擊日偽軍的交通線為目的而與日偽勢力進行游擊斗爭的英雄故事。他們配合主力部隊,起初在臨棗線上展開武裝活動,后又發展到去津浦干線上與敵人戰斗。他們以短槍和便衣,戰斗在敵人據點林立、重兵據守的鐵路線上,破鐵路、撞火車、搞機槍、奪物資,在火車上打殲滅戰,鬧得天翻地覆,震撼敵偽。